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  • 上海西格生物科技有限公司 主營:生化試劑,標準品,對照品,PCR試劑盒,?核酸檢測試劑盒,熒光定量檢測試劑盒,生化試劑盒?,比色法試劑盒,酶活性檢測試劑盒,ELISA試劑盒,酶聯免yi檢測試劑盒,試劑盒,ELISA試劑盒,抗體,重組蛋白,分光光度法檢測試劑盒,細胞株,原代細胞,細胞培養基,標準溶液產品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產品。

    輔酶ⅠNAD(H)比色法檢測試劑盒100管/48樣

    • 如果您對該產品感興趣的話,可以
    • 產品名稱:輔酶ⅠNAD(H)比色法檢測試劑盒100管/48樣
    • 產品型號:XG018111-100管/48樣
    • 產品展商:西格
    • 產品文檔:無相關文檔
    簡單介紹

    我司供應的輔酶ⅠNAD(H)比色法檢測試劑盒100管/48樣具有質量可靠、價格優惠、效果穩定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,來電咨詢并訂購!

    產品描述

    【友情提示】:本產品僅供科研研究使用,不得用于臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失,請仔細閱讀購買說明!

    產品名稱:輔酶ⅠNAD(H)比色法檢測試劑盒100管/48樣

    規格 : 50管/24樣

    測試方法:可見分光光度法

    商品介紹:

    測定意義

    輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和三羧酸循環(TCA)的主要氫受體,**的NADH經呼吸電子鏈(ETC)傳遞把電子交給氧,在合成ATP的同時,形成大量的ROS,同時NADH再生為NAD+。糖、脂、蛋白質三大代謝物質分解中的氧化反應絕大部分通過這一體系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于評價糖酵解和TCA循環的強弱。較高的NAD(H)及NADH/NAD+比值說明細胞呼吸耗氧量較高,處于過氧化狀態。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循環。另外,NAD+降解產物對細胞信號傳導、代謝和基因表達等具有重要的調控作用。

    測定原理

    分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NAD+和NADH,NADH通過PMS的遞氫作用,還原氧化型噻唑藍(MTT)為甲瓚,在570nm下檢測吸光值;而NAD+可被乙醇脫氫酶還原為NADH,進一步采用MTT還原法檢測。

    需自備的儀器和用品

    可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。


    特點:

           1、優化設計的實驗方案,1小時即可完成

           2、靈敏度高,操作便捷

           3、試劑盒提供檢測果糖所需的全套試劑 

    常見樣本處理方法:

    1、血清(漿)樣品:直接檢測。

    2、細胞或組織樣品的制備: 培養細胞:先收集細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細胞數量

    (104個):提取液體積(mL)為500~1000:1 的比例(建議 500萬細胞加入 1mL提取液) ,超聲波破碎細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲 3s,間隔10s,重復30 次)8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

    組織:按照組織質量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,

    加入 1mL提取液),進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

    實驗通用規則:

    1、洗液不夠時,可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。

    2、液體全部加完后,可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒,混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。

    3、底物有一定的毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,應盡量避免接觸。

    4、檢測前,要打開酶標儀,使之穩定10分鐘以上。

    5、吸取液體時,要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。

    6、將液體加到酶標孔中時,避免槍頭和孔內液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會自然流下去。

    7、溫浴時,要用不干膠或膠帶紙封好酶標板,防止水分的蒸發。

    8、洗板時,每次洗液加入后,應靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機時,倒去液體后,要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。

    9、用槍吸取液體時速度不能太快,以免產生氣泡而使吸取量不準確。

    10、底物是光敏感的,要在臨用前現配。

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    測定步驟:

    1.加樣

    1. 除包被外都需45度加樣

    2.加樣體積要準確

    3.管底加樣,不能加在管壁上

    4.加樣時不能產生氣泡

    2.溫浴

    1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。

    2.各ELISA板不應疊在一起。

    3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。

    4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。

    3.洗滌

    1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。

    2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。

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