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  • 上海西格生物科技有限公司 主營:生化試劑,標準品,對照品,PCR試劑盒,?核酸檢測試劑盒,熒光定量檢測試劑盒,生化試劑盒?,比色法試劑盒,酶活性檢測試劑盒,ELISA試劑盒,酶聯免yi檢測試劑盒,試劑盒,ELISA試劑盒,抗體,重組蛋白,分光光度法檢測試劑盒,細胞株,原代細胞,細胞培養基,標準溶液產品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產品。

    輔酶ⅠNAD(H)比色法檢測試劑盒50管/24樣

    • 如果您對該產品感興趣的話,可以
    • 產品名稱:輔酶ⅠNAD(H)比色法檢測試劑盒50管/24樣
    • 產品型號:XG018111-50管/24樣
    • 產品展商:西格
    • 產品文檔:無相關文檔
    簡單介紹

    輔酶ⅠNAD(H)比色法檢測試劑盒50管/24樣測試面廣:可測動物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養細胞以及細胞培養上清液等,部分試劑盒適用于檢測植物

    產品描述

    產品屬性:

    產品名稱 規格 檢測方法 貨號
    輔酶ⅠNAD(H)比色法檢測試劑盒50管/24樣
    50管/24樣
    可見分光光度法
    XG018111-50管/24樣
    商品介紹:

    測定意義

    輔酶ⅠNAD(H)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養細胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和三羧酸循環(TCA)的主要氫受體,**的NADH經呼吸電子鏈(ETC)傳遞把電子交給氧,在合成ATP的同時,形成大量的ROS,同時NADH再生為NAD+。糖、脂、蛋白質三大代謝物質分解中的氧化反應絕大部分通過這一體系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于評價糖酵解和TCA循環的強弱。較高的NAD(H)及NADH/NAD+比值說明細胞呼吸耗氧量較高,處于過氧化狀態。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循環。另外,NAD+降解產物對細胞信號傳導、代謝和基因表達等具有重要的調控作用。

    測定原理

    分別用酸性和堿性提取液提取樣品中NAD+和NADH,NADH通過PMS的遞氫作用,還原氧化型噻唑藍(MTT)為甲瓚,在570nm下檢測吸光值;而NAD+可被乙醇脫氫酶還原為NADH,進一步采用MTT還原法檢測。

    需自備的儀器和用品

    可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。


    優點如下:

    1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。

    2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。

    3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。

    4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。

    5、再現性好:變異系數CV=1.7%。

    6、回收試驗: X =103.3%。

    7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。

    8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。


    注意事項:

    ①加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

    ②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。

    ③按照雞血紅蛋白(HB)ELISA檢測試劑盒說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

    ④底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

    ⑤洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。

    ⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器 。

    ⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。

    ⑧試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。

    ⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。


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    操作流程:


    1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

    2. 設置標準品孔和樣本孔,標準品孔各加不同濃度的標準品50μL;

    3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

    4. 除空白孔外,標準品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

    5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復洗板5次(也可用洗板機洗板)。

    6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

    7. 每孔加入終止液50μL,15min內,在450nm波長處測定各孔的OD值。




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