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  • 上海西格生物科技有限公司 主營:生化試劑,標準品,對照品,PCR試劑盒,?核酸檢測試劑盒,熒光定量檢測試劑盒,生化試劑盒?,比色法試劑盒,酶活性檢測試劑盒,ELISA試劑盒,酶聯免yi檢測試劑盒,試劑盒,ELISA試劑盒,抗體,重組蛋白,分光光度法檢測試劑盒,細胞株,原代細胞,細胞培養基,標準溶液產品。代理并銷售進口SIGMA試劑、abcam抗體、R&D抗體、CST抗體、ATCC細胞、BD公司、GE公司、賽默飛世爾公司產品。

    甲型流感病毒試劑盒熒光PCR法?

    • 如果您對該產品感興趣的話,可以
    • 產品名稱:甲型流感病毒試劑盒熒光PCR法?
    • 產品型號:XG-R63210?
    • 產品展商:西格
    • 產品文檔:無相關文檔
    簡單介紹

    甲型流感病毒試劑盒熒光PCR法?保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

    產品描述
    產品特點:
    靈敏度高:可檢測個位拷貝數的基因
    特異性高:有效避免非特異性擴增的出現
    穩定性高:復孔間差異小,實驗結果重復性強
    擴增性能優:擴增效率高,熒光信號強
    產品名稱 甲型流感病毒試劑盒熒光PCR法
    規格 50T
    貨號 XG-R63210
    儲存條件:
    僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
    1. 血清:使用不含熱原和內**的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
    2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
    3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
    4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
    5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

    PCR實驗方法步驟:

    方法
    1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
    10×PCR buffer                   
    5 μl     dNTP mix (2mM)             
    4 μl     引物1(10pM)                 
    2 μl     引物2(10pM)                 
    2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
    1 μl     DNA模板(50ng-1μg/μl)  
    1 μl      加ddH2O至 50 μl  

    實驗過程:
    一、試劑準備
    1. DNA模板
    2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
    3.10×PCR Buffer
    4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
    5.Taq酶
    二、操作步驟
    1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
    10×PCR buffer             5μl
    dNTP mixl                 4μl
    引物1(10pM)               2μl
    引物2(10PM)              2μl
    Taq酶(2U/μl)            1μl
    DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
    加ddH2O至               50 μl
    視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
    2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
    3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
    4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
    三、注意事項
    1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行。zui好設立一個專用的PCR實驗室。
    2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
    3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
    4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾高壓。
    5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
    6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓。
    7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
    小鼠血管抑素(mouse Angiostatin) ELISA 48T/96T 進口分裝
    小鼠載脂蛋白E(mouse APO E) ELISA 48T/96T 進口分裝
    小鼠B細胞刺激因子(mouse BAFF) ELISA 48T/96T 進口分裝
    小鼠凋亡因子BAX(mouse BAX) ELISA 48T/96T 進口分裝
    小鼠細胞凋亡相關基因(mouse BCL-2) ELISA 48T/96T 進口分裝
    小鼠腦衍化神經營養因子(mouse BDNF) ELISA 48T/96T 進口分裝
    小鼠腦衍化神經營養因子受體(mouse BDNF R) ELISA 48T/96T 進口分裝
    小鼠骨成型蛋白-2(mouse BMP-2) ELISA 48T/96T 進口分裝
    小鼠骨成型蛋白-4(mouse BMP-4) ELISA 48T/96T 進口分裝
    小鼠骨成型蛋白受體1A(mouse BMP-R1A) ELISA 48T/96T 進口分裝
    小鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(mouse BMP-R2) ELISA 48T/96T 進口分裝
    小鼠腦鈉肽(mouse BNP) ELISA 48T/96T 進口分裝

    芳香胺N-乙?;D移酶抗體
    腺苷酸環化酶8抗體
    腺苷酸環化酶10抗體
    腺苷酸環化酶5抗體
    腺苷酸環化酶6抗體
    腺苷酸環化酶9抗體
    肌萎縮側索硬化癥相關蛋白2抗體
    三磷酸腺檸檬酸裂解酶抗體
    β淀粉樣蛋白前體結合蛋白B-1抗體
    內收蛋白a1抗體
    α2纖溶酶色素上皮衍生因子抗體
    膜粘連蛋白7抗體
    早老素γ分泌酶抗體
    鈉鉀ATP酶蛋白a1抗體
    Rho鳥苷酸交換因子2抗體
    磷酸化Rho鳥苷酸交換因子2抗體
    去整合素樣金屬蛋白酶9抗體
    艾滋病病毒制約錨定蛋白抗體
    腺苷酸環化酶1抗體
    核糖核酸酶L抑制蛋白抗體
    Rho GTP酶激活蛋白24抗體
    甲型流感病毒試劑盒熒光PCR法GTP酶激活蛋白ASAP3抗體
    激活素受體1C抗體
    整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶13型抗體
    去整合素樣金屬蛋白酶11抗體
    檢測步驟:
    一、 試劑的準備
    從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
    設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
    試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
    熒光PCR反應液 14μL N×14μL
    酶混合物 1 μL N×1 μL
    總量 15 μL N×15μL
    (1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
    7.2 qPCR反應條件
    將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
    推薦循環條件:
    1循環 50℃ for 2 min
    預變性 1循環 95℃ for 10 min
    PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
    60℃ for 60 sec
    在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

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